研究基因在代謝通路或某些特定疾病發(fā)生過程中的功能,對(duì)于疾病機(jī)理研究及藥物研發(fā)具有非常重要的意義。新一代基因編輯技術(shù)CRISPR以其操作簡單和通用的獨(dú)特優(yōu)勢(shì),成為開展正向遺傳學(xué)篩選實(shí)驗(yàn)強(qiáng)有力的工具。利用CRISPR技術(shù)建立可能與某類功能相關(guān)的突變體庫,通過功能性篩選和富集、PCR擴(kuò)增及深度測(cè)序分析,確認(rèn)與這類功能相關(guān)的基因。
泓迅生物利用獨(dú)創(chuàng)的“GPS”(Genotype,Phenotype,Synotype)平臺(tái),提供基于CRISPR sgRNA文庫的一站式基因功能篩選服務(wù)。我們專利的Syno?合成技術(shù)平臺(tái),可以快速高效地實(shí)現(xiàn)sgRNA文庫構(gòu)建,并包裝成慢病毒混合文庫后轉(zhuǎn)染細(xì)胞。結(jié)合高通量/高內(nèi)涵篩選平臺(tái),利用控制細(xì)胞存活、結(jié)合免疫染色、流式細(xì)胞術(shù)等手段篩選得到所需細(xì)胞,最終通過測(cè)序等方法推斷出發(fā)揮作用的靶基因。
服務(wù)項(xiàng)目 | 服務(wù)詳情 | 周期 |
---|---|---|
sgRNA設(shè)計(jì) |
針對(duì)特定基因分類進(jìn)行g(shù)RNA序列設(shè)計(jì) 每個(gè)基因設(shè)計(jì)3-6條sgRNA |
1-2周 |
芯片合成 | 將所設(shè)計(jì)的所有sgRNA及陰性對(duì)照合成在一張芯片上 | 3-4周 |
sgRNA文庫構(gòu)建 | 將sgRNA構(gòu)建到客戶的目標(biāo)載體上 | 2-3周 |
文庫質(zhì)粒大抽 | 根據(jù)發(fā)貨量進(jìn)行轉(zhuǎn)染級(jí)質(zhì)粒抽提 | 1周 |
文庫質(zhì)檢及NGS驗(yàn)證(可選) |
1. 克隆覆蓋倍數(shù)必須大于100倍 |
2-3周 |
病毒包裝(可選) | 慢病毒包裝,病毒滴度: 108TU/ml | 2-3周 |
總計(jì) | 11-16周 |