基因合成需要評估序列難度，一般情況下1-2周，micrna-181a-5p屬于siRNA合成，周期需要5-7工作日。

有的，pSmart-I質(zhì)粒。

該服務(wù)屬于Trimer引物合成服務(wù)。

具體還是需要確認：

1、是合成文庫還是只是做引物合成？

2、具體序列信息，突變位點信息，包括具體幾個點做突變，突變是飽和突變還是有指定突變的氨基酸比例要求？

3、需要全長序列,載體信息也要確認下。

可以

基因合成需要客戶提供質(zhì)粒。

可以，就是基因合成，只需要客戶提供抗體的重鏈和輕鏈序列就可以。

我們目前的抗體表達載體是鼠源和人源，可以合成goat，chicken或者sheep的全長抗體序列裝到pTT5里進行表達。

大概需要1-2ug即可。

有慢病毒載體:pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP和pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro.可以問下客戶的研究目的.?如果客戶做蛋白的建議還是不要建議這兩個載體。

轉(zhuǎn)染細胞一般用flag檢測表達情況。如果有標簽可以做WB來鑒定是否表達。用熒光載體或QPCR檢測是否轉(zhuǎn)染細胞。若質(zhì)粒沒有加熒光可以用QPCR檢測。

1、引物 更換引物嘗試，設(shè)置陽性對照（其他同載體的質(zhì)粒）和陰性對照（空載體）看是否引物問題。
2、PCR擴增體系 一般問題不大，可以看下退火溫度等信息。
3、抗性是否加錯，抗性濃度是否正常。

選擇合適的表達系統(tǒng)需考慮蛋白質(zhì)的大小、復(fù)雜性、翻譯后修飾需求、表達量和純度要求。原核系統(tǒng)適用于簡單蛋白，哺乳動物系統(tǒng)適用于復(fù)雜蛋白。